【冯仁丰】认识临床实验室的溯源性(6): 不同计量水平下的实现溯源性的过程
发布日期：2019-11-11 来源：本站 浏览数：2229 人
在ISO 17511（2014）的征求意见稿中，详细地叙述了不同计量水平下，实现溯源性的校准转换模式。这是远远好于原ISO17511的文件内容。
这里将逐一向大家介绍。这个微信中将首先介绍被测量具有一级参考检测程序、也有一级参考检测程序的最高形式。
5 计量溯源性的校准转换方案的模式
5.1 具有一级参考检测程序和一级校准品的情况；完整的计量溯源性到SI制（见图1）。
图1 具有完整计量溯源性至SI
5.1.1 在图1中叙述的校准等级（层次），应用到分析物的可检测的量，如电解质、一些代谢物、一些激素、和一些药物。
5.1.2 在一个校准层次中，提供了计量溯源性到SI，一些概念在适当时应按照图1的步骤去考虑：
a）被测量的定义应包括检测的SI单位，无论是基础的或导出的量，计量溯源性最好应参照到那个量。
注1：在校准层次中不同步骤的分析物会有变化，由于物质受检测改变，也会以不同的SI单位表达。
b）[p.1.,p.2] 一级参考检测程序和其他较高等级的参考检测程序应以检测原理为基础，被证实是分析上是特异的，提供了计量溯源性到某个SI的检测单位，并具很低的检测不确定度。
注1：一级参考检测程序的文件，应符合ISO15193的要求。
注2：在某个给定时间为给定种类的一级校准品量定值时，可出现多于一个一级参考检测程序。对某个给定被测量由两个或更多的一级参考检测程序得到的值，没有显著差异，在规定的不确定度内，在某个水平的可信性。
c）[m.1.] 一级参考物质是检测单位的实现（体现），具有检测最小达到的不确定度。该物质通常是高度纯化的、一个物理-化学上明确的分析物，被检查了稳定性、成分的完整性、并伴有一个证书（有证的参考物质，CRM）。一级参考物质应具有它的设定值，或直接由一级参考检测程序、或由质量平衡法获取。
注：D-葡萄糖作为NIST的SRM 917b；在物质中，D-葡萄糖的质量组分是997mg/g，扩展的检测不确定度为0.2mg/g（被测量是D-葡萄糖在纯化的结晶物质内的质量组分，以mg/g表达）。
示例2：NIST的SRM 911b的胆固醇；质量组分0.988 ± 0.001，纯度和不确定度是依据科学判断和许多分析检测的评价，被应用在这个SRM的certification检定过程。不确定度给出的约是关于真实值的两个标准差（值0.001是扩展因子k =2的扩展不确定度，给出的可信限水平约0.95）。
d）[m.1.] 一级校准品应可制备，或由一级参考检测程序为之设定值。
注：经常地，这个程序将是一个称量配制或称重程序，接着在容量瓶中将一级参考物质以相应溶剂溶解并稀释至一定体积。如果提供的是一个CRM，则为一级校准品的定值和建立文件，应符合ISO 15194:2009的要求。
示例：血浆内的可的松。该一级参考物质（具有已知纯度）以称量法和容量法稀释配制，接着以各种化学方法初始评估其不纯度。
e）[p.2.]一个相应的参考检测程序应被用于对具有复杂基质的二级校准品(m.2)定值。
注 1：这样的二级基质物质(m.2)将通常具有一个基质，类似于由终点用户常规检测程序检测的人原始样品。以确保它们在检测程序中是可互换的，可以用于校准。
示例：SRM 965a，在冰冻人血清中的葡萄糖，具有证实的值，范围从1.918mmol/L到16.24mmol/L。使用核素稀释的GC-MS程序定值。（被测量是D-葡萄糖在冰冻人血清中的物质量浓度，表示为mmol/L）。
注2：二级参考检测程序可用于为一个复杂基质的校准品物质定值。在这个情况下，产生的定值校准品应被考虑为二级校准品。即，在可用下由一个或多个一级或二级校准品的校准品。
注：一个厂商的选定检测程序可以是一个二级参考检测程序。
示例：血浆可的松浓度，核素稀释-气相层析-质谱分析（ID-GC/MS）是一个选定的检测程序。
g）[m.3.] 厂商的工作校准品应按照一个或多个厂商选定的检测程序设定它的定值，这个校准品有时被称为“厂商一级（master）校准品”（或“自制校准品”）。校准物质应已经证明了对于厂商选定的检测程序(p.3)和被校准程序（即厂商常设检测程序[p.4]）的互换性。
注 1、厂商工作校准品可以是，如具有与人原始样品类似基质的物质，由终点用户的常规检测程序检测。
注2、厂商工作校准品(m.3)的定值，可以a）称量法，即以一级校准品形式称量分析物和称量某基质；或b）检测，即应用一级或二级参考检测程序的检测确定。
h）[p.4.] 厂商常设的检测程序应确定一个检测程序，由一个或多个厂商的工作校准品、或较高类型的校准品校准，被确认它的分析特异性。
注：厂商的常设检测程序可以依据相同原理和检测方法，作为常规检测程序，但应具有较低的检测不确定度，通过如，大量的重复检测和严格的控制系统。
i）[m.4.] 厂商产品校准品应具有厂商的常设的检测程序设定它的值，被预期作为终点用户检测程序的校准。
注：厂商的产品校准品可以是，如具有类似于终点用户的常规检测程序检测的人原始样品那样的具有基质的物质。
j）[p.5.] 终点用户的常规检测程序应叙述一个检测系统，经常有厂商（包括实验室，若是实验室自行开发的检测）提供、由一个或多个厂商的产品校准品校准。
5.1.3 在一个校准层次的连续水平（即，一个校准品和为它定值的相应参考检测程序）被省略下，可以减少不确定度。原则上，如果为厂商产品校准品和病人样品定值的声明，计量溯源性到SI的话，要素p.1, m.1, p.2, m.2, p.3, 和m.3，应被考虑是不可缺少的。
我的解释：
1、图的左侧，均为“物质”。在原ISO17511的文件中，将所有这些物质称为校准品。图的右侧，均为“检测程序”。
2、图中的各个自右向左的箭头，均为箭头上端的检测程序为箭头下端的物质，经过检测为左下物质给予设定值。图右最上端的p.1程序是不需要任何参考物质或校准品去校准的程序。这是在计量上最高级的检测程序。这样的检测程序p.1对m.1物质的检测，确定了该物质的量（具有SI单位的量）。
3、该图的最上方，有一个“被测量的定义”。说明，该溯源性链的被测量，具有明确的被测量定义。如该图上的m.1，是以美国的NIST建立的标准参考物质为示例。这是一个可以称量的干燥物质。因此，完全可以由称量法和容量法配制标准溶液，作为一个校准品，去校准p.2的检测程序，传递溯源性。
4、所有从左向右的箭头，均为向下的。这是以箭头上方的校准品（参考物质），去校准箭头下方的检测程序。右向箭头左上方的校准品（参考物质），与左下方的检测程序组合在一起，对该检测程序向下的左向箭头所指的那个校准品（参考物质），进行检测确定它（们）的定值。如该图中的m.2物质，它可以是图示所示的CRM（有证参考物质），这是使用国际认可的一级参考物质m.1，对较高等级的检测程序p.2校准后，进行检测。从溯源关系上，这个m.2物质的定值，可上溯到m.1物质，然后在溯源至被测量的定义（这是具有SI单位的最高级）。
5、从p.1、到m.1、到p.2、再到m.2，这整个过程都是在国际或国家认可的参考研究院内实施的。确保了对m.2物质的定值的可靠性和溯源性。
6、在m.2方块内容中，还说明，m.2的物质可以是一组病人标本。在很多情况下，通过m.1参考物质和p.2较高等级参考检测程序的组合，对一组病人标本的检测，使这些病人标本得到了可靠的检测结果，并具有明确的溯源性。这样，厂商获取这些具有参考值的新鲜病人标本，在公司内依靠这些血清，将血清检测结果的可靠性传递给公司的内部一级（master）校准品。公司再以该校准品，将检测结果的可靠性以此传递给公司的常设的、工作的、和商品校准品。每一个传递过程，都是在检测一组病人样品结果中，以具有参考值的血清为准，不断调整公司设定选定的、常设的、工作的校准品的值，在每次比对中，实现比对结果为最佳状态下，确定这些校准品的定值。
7、从p.3起，到m.3，到p.4，最后到m.4，这整个过程的量值可靠性传递，都是由公司内部进行的。
8、p.3为厂商选定的检测程序。它是厂商为了确保公司所有该被测量的产品检测结果具有可靠性设定的。顾名思义是值公司内部不可更换的一个程序，它可以与参考实验室使用的某个参考检测程序相同，也可以是公司自行选择确定的某个检测程序。它是公司内部的一个较高等级的参考检测程序，可确保该检测程序对病人样品的检测结果具有溯源性。
9、p.3的检测程序，与m.3校准品组合，形成了检测系统。对m.3公司的一级校准品定值。在这个定值，不是直接将m.3当做样品进行检测。而是如我解释的第6点叙述的，对一组病人样品进行m.2和p.2组合、与m.3和p.3组合的比对。在比对中，必须将m.3的定值，调整到使二者检测系统对相同病人样品检测结果的比对为最佳下，确定m.3的校准品。
10、m.3接着与p.4检测程序组合，对m.4校准品定值，这个定值做法与前述相同，即m.4和p.5检测程序组合的检测系统，与m.3和p.4组合的检测系统，检测相同一组病人样品进行结果的比对。在比对中，不断调整m.4校准品的值，使二者检测系统比对一致，此时m.4校准品的定值可确定下来。
11、这样，产品校准品m.4和公司的产品（仪器和试剂组合）p.5的组合，在临床实验室用户手中，对病人样品的检测结果具有可靠性，并且可以使结果逐层上溯至最高的SI单位，实现溯源性。
12、这个示例在整个溯源性链中是最完整的。即该被测量既有最高级的参考物质，也具有最高级的参考检测程序。
其他不同被测量的溯源关系的解释，可以参考该例。
（待续）
来源：微信公众号“冯仁丰”
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