本期给大家介绍的是一篇利用液质联用检测卡马西平的参考方法。该方法是由罗氏诊断和列支敦士登沙恩的实验室医疗中心共同开发，发布于Clinica Chimica Acta期刊。

        我们在国际检验医学溯源联合委员会(JCTLM)官网查到，该篇方法是JCTLM唯一推荐用来检测卡马西平的参考方法。希望该方法能给计划开发卡马西平检测方法的老师提供一些参考和思路。

        好了，下面我们开始进入正题吧。

        简介

        卡马西平是用来治疗三叉神经痛、痉挛、癫痫等的精神性药物。在人体内主要通过刚脏内的CYP3A4酶代谢成为10, 11-环氧卡马西平(CBZ-E)。然后，10, 11-环氧卡马西平会进一步降解为10, 11-二羟基卡马西平 (DiOH-CBZ)。

        文章中提到，奥氮平具有和卡马西平类似的结构和药效，奥氮平首先代谢成为10-羟基卡马西平（10-OH-CBZ），然后10-羟基卡马西平也会进一步代谢成为10,11-二羟基卡马西平。为什么要进行药物监测呢？以卡马西平这种精神性药物为例，服用此类药物后，可能会出现皮肤疾病、血液疾病、免疫系统疾病、肾脏和肝脏疾病的不良反应。治疗药物监测能够帮助我们及时调整剂量，避免出现未达剂量或者药物中毒的现象，从而达到理想的治疗效果。卡马西平在人血浆中比较理想的浓度为4-12μg/ml。之前，TDM都是通过免疫方法进行的，但是在这种方法易受一些相关化合物、代谢物、基质等干扰，从而导致非特异性干扰。LC-MS方法具有特异性和灵敏度，以及更好的准确度和精密度。该文章用到的校准品为ISO认证的参考物质 (ISO Guide 34, ISO/IEC 17025, ISO 13485 and ISO 9001)。为了使方法标准化，作者对两种主要的具有药理活性的CBZ-E和10-OH-CBZ进行了检测，来排除交叉反应性。

        其中参考物质CBZ、CBZ-E、10-OH-CBZ均是购自Cerilliant，用于配制校准品的空白人血清是从Roche Diagnostics GmBh（罗氏诊断有限公司）得到。

        前处理方法操作简介

        取100μL样本，加入标准品后，使用热混合器（1400rpm，30℃）孵化30min，然后使用900μL乙腈进行蛋白沉淀操作。经沉淀过滤后的样本用去离子水稀释50倍，转移到进样瓶中，最后保存在4-8℃条件下待测。

        LC-MS/MS条件简介

液相条件：
       Dionex RSLC 3000 HP液相（ThermoFisher Scientific, Germering, Germany），Waters xTerra MS C8色谱柱（2.5 μm, 2.1 × 100 mm, Waters, Milford, USA），流速0.3ml/min, 柱温45℃,进样量5μL。

表1 液相梯度

        所用质谱为TSQ Quantum Ultra 三重四极杆质谱 (ThermoFisher Scientific)，目标物离子信息如下：

目标物离子信息

        作者为了考察不同实验室间的方法一致性，设计了与另一个实验室的对比实验。另一家实验室使用的为Agilent 1200 HPLC与ABSCIEX的API 4000液质联用仪，前处理方法相同，其他条件不再赘述。

        精密度和准确度是由四个不同浓度水平的加标基质样本进行评估的。CBZ、CBZ-E的日内和日间的不精密度分别为小于4.4% CV和4.5% CV。10-OH-CBZ高浓度水平的日内不精密度为小于3.9% CV，其定量限（LOQ）日内不精密度为小于7.4% CV。在在所有分析样本中，高浓度水平样本准确度均在95.6%~98.7%之间，低浓度水瓶样本准确度在90.5%~98.7%之间。其他结果不再赘述。

加标样本色谱图

不精密度和准确度数据

基质效应、回收率、提取效率数据

        如有原文需求的老师可以留言，并附上邮箱。

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